#METABOLOMICS WORKBENCH cclish_20201105_091317 DATATRACK_ID:2229 STUDY_ID:ST001521 ANALYSIS_ID:AN002534 PROJECT_ID:PR001024 VERSION 1 CREATED_ON 08-19-2025 #PROJECT PR:PROJECT_TITLE Role of Diet in the Reconstitution of the Human Gut Microbiome and its PR:PROJECT_TITLE Metabolome PR:PROJECT_TYPE Observational study PR:PROJECT_SUMMARY We studied the impact of three divergent diets, vegan, omnivore, and a synthetic PR:PROJECT_SUMMARY enteral nutrition (EEN) diet lacking fiber, on the human gut microbiome and its PR:PROJECT_SUMMARY metabolome in a longitudinal analysis that included a microbiota depletion PR:PROJECT_SUMMARY intervention. Hybrid nontargeted LC-MS methods were used to profile stool and PR:PROJECT_SUMMARY plasma metabolites. PR:INSTITUTE Broad Institute of MIT and Harvard PR:LAST_NAME Clish PR:FIRST_NAME Clary PR:ADDRESS 415 Main Street, Cambridge, MA, 02142, USA PR:EMAIL clary@broadinstitute.org PR:PHONE 617-714-7654 PR:FUNDING_SOURCE Crohn’s & Colitis Foundation, P30 DK 050306, PennCHOP Microbiome Program, and PR:FUNDING_SOURCE the Penn Center for Nutritional Science and Medicine PR:DOI http://dx.doi.org/10.21228/M8B984 PR:CONTRIBUTORS Ceylan Tanes, Kyle Bittinger, Yuan Gao, Elliot S. Friedman, Lisa Nessel, Unmesha PR:CONTRIBUTORS Roy Paladhi, Lillian Chau, Erika Panfen, Michael A. Fischbach, Jonathan Braun, PR:CONTRIBUTORS Ramnik J. Xavier, Clary B. Clish, Hongzhe Li, Frederic D. Bushman, James D. PR:CONTRIBUTORS Lewis, Gary D. Wu #STUDY ST:STUDY_TITLE Plasma metabolites of known identity profiled using hybrid nontargeted methods ST:STUDY_TITLE (part-III) ST:STUDY_SUMMARY We determined the effect of diet on the composition and metabolic function of ST:STUDY_SUMMARY human gut microbiome using a controlled feeding experiment with three divergent ST:STUDY_SUMMARY diets (vegan, omnivore, and an exclusive enteral nutrition diet (EEN) devoid of ST:STUDY_SUMMARY dietary fiber) in the Food And Resulting Microbial Metabolites (FARMM) study. ST:STUDY_SUMMARY The study included an antibiotic and polyethylene glycol (Abx/PEG) intervention ST:STUDY_SUMMARY to dynamically assess the effect of diet on the reconstitution of the gut ST:STUDY_SUMMARY microbiota and its associated fecal and plasma metabolome. Samples from thirty ST:STUDY_SUMMARY healthy volunteers between the ages of 18 and 60, 10 mper diet group were ST:STUDY_SUMMARY analyzed. Self-reported vegans were required to have followed a vegan diet for a ST:STUDY_SUMMARY minimum of 6 months prior to enrollment. Key exclusion criteria included ST:STUDY_SUMMARY inflammatory bowel disease, celiac disease, or other chronic intestinal ST:STUDY_SUMMARY disorders; prior bowel resection surgery other than appendectomy; baseline bowel ST:STUDY_SUMMARY frequency less than every 2 days or greater than 3 times daily; creatinine ST:STUDY_SUMMARY concentration greater than the upper limit of normal; diabetes mellitus; ST:STUDY_SUMMARY currently smoking; body mass index (BMI) <18.5 or >35; and use of antibiotics ST:STUDY_SUMMARY and probiotics in the prior 6 months. The 10 vegans continued to follow their ST:STUDY_SUMMARY usual diet as outpatients. All participants completed the Diet History ST:STUDY_SUMMARY Questionnaire II (DHQ II), a food frequency questionnaire developed by the Risk ST:STUDY_SUMMARY Factor Monitoring and Methods Branch of the National Cancer Institute. The vegan ST:STUDY_SUMMARY participants also completed three 24 hour diet recalls with a dietitian in the ST:STUDY_SUMMARY week prior to starting antibiotics. We randomly assigned the 20 omnivores to ST:STUDY_SUMMARY receive an omnivore diet or EEN (Modulen® IBD) while residing in an inpatient ST:STUDY_SUMMARY research unit. The macronutrient composition of Modulen® is protein 36g, fat ST:STUDY_SUMMARY 47g, and carbohydrate 110g per 1000 Kcal. The two omnivore diets were engineered ST:STUDY_SUMMARY to have a similar composition to EEN. All the subjects consumed the menu A on ST:STUDY_SUMMARY day 11 and menu B on days 4 and 14. Diets for omnivores were constructed to ST:STUDY_SUMMARY provide the expected total calories required per day for the participant to ST:STUDY_SUMMARY maintain their current weight and were adjusted if there was weight gain or loss ST:STUDY_SUMMARY of more than 2.5 pounds. On days 6, 7, and 8, inpatients participants received ST:STUDY_SUMMARY vancomycin 500mg orally every 6 hours and neomycin 1000mg orally every 6 hours. ST:STUDY_SUMMARY On day 7, participants consumed 4L of polyethylene glycol (PEG) based bowel ST:STUDY_SUMMARY purgative (GoLytely®). Participants in the omnivore and EEN arms left the ST:STUDY_SUMMARY inpatient research unit only under the direct supervision of a research staff ST:STUDY_SUMMARY member. The vegan outpatients reported to the hospital twice on days 6,7 and 8 ST:STUDY_SUMMARY to receive antibiotics and to consume PEG on day 7. The first stool sample of ST:STUDY_SUMMARY each day of the inpatient groups was collected, aliquoted and frozen immediately ST:STUDY_SUMMARY at -80oC. Blood was collected on days 1, 5, 9, 12 and 15 from which plasma ST:STUDY_SUMMARY aliquots were immediately isolated and frozen at -80oC. The outpatient ST:STUDY_SUMMARY participants following the vegan diet also had blood collected on days 1, 5, 9, ST:STUDY_SUMMARY 12, and 15 from which plasma aliquots were immediately isolated and frozen at ST:STUDY_SUMMARY -80oC. Among these participants, the first stool of the day was collected at ST:STUDY_SUMMARY home daily and kept on ice packs until it was brought to the research unit where ST:STUDY_SUMMARY it could be aliquoted and frozen. Samples from vegans were received for ST:STUDY_SUMMARY aliquoting within 24 hours and on average within 4 hours (Wu et al., 2010). Day ST:STUDY_SUMMARY 0 stool was not collected from vegans since their diet did not change. The ST:STUDY_SUMMARY aliquoted amounts for all samples ranged from 500 mg to 1 g. The aliquots were ST:STUDY_SUMMARY taken from different areas of the sample. Remaining sample was then collected ST:STUDY_SUMMARY into one residual 50 ml conical tube with a tongue depressor. Any remaining ST:STUDY_SUMMARY stool was discarded. The University of Pennsylvania Institutional Review Board ST:STUDY_SUMMARY (IRB) approved the research protocol. ST:INSTITUTE Broad Institute of MIT and Harvard ST:LAST_NAME Clish ST:FIRST_NAME Clary ST:ADDRESS 415 Main Street, Cambridge, MA, 02142, USA ST:EMAIL clary@broadinstitute.org ST:PHONE 617-714-7654 ST:SUBMIT_DATE 2020-11-05 #SUBJECT SU:SUBJECT_TYPE Human SU:SUBJECT_SPECIES Homo sapiens SU:TAXONOMY_ID 9606 SU:AGE_OR_AGE_RANGE 20-60 SU:WEIGHT_OR_WEIGHT_RANGE BMI range: 20-35 SU:GENDER Male and female SU:HUMAN_RACE White; American Indian/Alaskan Native; Black/African American SU:HUMAN_ETHNICITY Hispanic or Latino; Non-Hispanic or Latino SU:HUMAN_TRIAL_TYPE Intervention trial SU:HUMAN_EXCLUSION_CRITERIA Key exclusion criteria included inflammatory bowel disease, celiac disease, or SU:HUMAN_EXCLUSION_CRITERIA other chronic intestinal disorders; prior bowel resection surgery other than SU:HUMAN_EXCLUSION_CRITERIA appendectomy; baseline bowel frequency less than every 2 days or greater than 3 SU:HUMAN_EXCLUSION_CRITERIA times daily; creatinine concentration greater than the upper limit of normal; SU:HUMAN_EXCLUSION_CRITERIA diabetes mellitus; currently smoking; body mass index (BMI) <18.5 or >35; SU:HUMAN_EXCLUSION_CRITERIA and use of antibiotics and probiotics in the prior 6 months SU:SPECIES_GROUP Mammals #SUBJECT_SAMPLE_FACTORS: SUBJECT(optional)[tab]SAMPLE[tab]FACTORS(NAME:VALUE pairs separated by |)[tab]Additional sample data SUBJECT_SAMPLE_FACTORS 9010 9010-1-PE Study_Diet:Western | Sex:Female | Time:Baseline Type=Plasma; Age=24; BMI=21.8; Race=White; Ethnicity=Not Hispanic or Latino; RAW_FILE_NAME=0150_WUG_FARMM_HIL-9010-1-PE.raw 0150_WUG_FARMM_LIP-9010-1-PE.raw 0150_WU_FARMM_CMH_9010-1-PE.raw 0150_WUG_FARMM_FFA-9010-1-PE.raw SUBJECT_SAMPLE_FACTORS 9015 9015-1-PE Study_Diet:Western | Sex:Female | Time:Baseline Type=Plasma; Age=23; BMI=20.5; Race=White; Ethnicity=Not Hispanic or Latino; RAW_FILE_NAME=0098_WUG_FARMM_HIL-9015-1-PE.raw 0098_WUG_FARMM_LIP-9015-1-PE.raw 0098_WU_FARMM_CMH_9015-1-PE.raw 0098_WUG_FARMM_FFA-9015-1-PE.raw SUBJECT_SAMPLE_FACTORS 9005 9005-1-PE Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Baseline Type=Plasma; 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Age=NA; BMI=NA; Race=NA; Ethnicity=NA; RAW_FILE_NAME=0140a_WUG_FARMM_HIL-QPP08.raw 0150a_WUG_FARMM_LIP-QCPP08.raw 0120a_WU_FARMM_CMH_QPP-08.raw 0150a_WUG_FARMM_FFA-QCPP08.raw SUBJECT_SAMPLE_FACTORS QC-pooled_plasma QPP09 Study_Diet:NA | Sex:NA| Time:NA Type=Plasma; Age=NA; BMI=NA; Race=NA; Ethnicity=NA; RAW_FILE_NAME=0150a_WUG_FARMM_HIL-QPP09.raw NA 0140a_WU_FARMM_CMH_QPP-09.raw NA SUBJECT_SAMPLE_FACTORS QC-pooled_plasma QPP10 Study_Diet:NA | Sex:NA| Time:NA Type=Plasma; Age=NA; BMI=NA; Race=NA; Ethnicity=NA; RAW_FILE_NAME=NA NA 0150a_WU_FARMM_CMH_QPP-10.raw NA #COLLECTION CO:COLLECTION_SUMMARY The first stool sample of each day of the inpatient groups was collected, CO:COLLECTION_SUMMARY aliquoted and frozen immediately at -80oC. Blood was collected on days 1, 5, 9, CO:COLLECTION_SUMMARY 12 and 15 from which plasma aliquots were immediately isolated and frozen at CO:COLLECTION_SUMMARY -80oC. The outpatient participants following the vegan diet also had blood CO:COLLECTION_SUMMARY collected on days 1, 5, 9, 12, and 15 from which plasma aliquots were CO:COLLECTION_SUMMARY immediately isolated and frozen at -80oC. Among these participants, the first CO:COLLECTION_SUMMARY stool of the day was collected at home daily and kept on ice packs until it was CO:COLLECTION_SUMMARY brought to the research unit where it could be aliquoted and frozen. Samples CO:COLLECTION_SUMMARY from vegans were received for aliquoting within 24 hours and on average within 4 CO:COLLECTION_SUMMARY hours (Wu et al., 2010). Day 0 stool was not collected from vegans since their CO:COLLECTION_SUMMARY diet did not change. The aliquoted amounts for all samples ranged from 500 mg to CO:COLLECTION_SUMMARY 1 g. The aliquots were taken from different areas of the sample. Remaining CO:COLLECTION_SUMMARY sample was then collected into one residual 50 ml conical tube with a tongue CO:COLLECTION_SUMMARY depressor. Any remaining stool was discarded. The University of Pennsylvania CO:COLLECTION_SUMMARY Institutional Review Board (IRB) approved the research protocol. CO:SAMPLE_TYPE Blood (plasma) CO:STORAGE_CONDITIONS -80℃ #TREATMENT TR:TREATMENT_SUMMARY The 10 vegan participants continued to follow their usual diet as outpatients. TR:TREATMENT_SUMMARY All participants completed the Diet History Questionnaire II (DHQ II), a food TR:TREATMENT_SUMMARY frequency questionnaire developed by the Risk Factor Monitoring and Methods TR:TREATMENT_SUMMARY Branch of the National Cancer Institute. The vegan participants also completed TR:TREATMENT_SUMMARY three 24 hour diet recalls with a dietitian in the week prior to starting TR:TREATMENT_SUMMARY antibiotics. 20 omnivores were randomly assigned to receive an omnivore diet or TR:TREATMENT_SUMMARY EEN (Modulen® IBD) while residing in an inpatient research unit. The TR:TREATMENT_SUMMARY macronutrient composition of Modulen® is protein 36g, fat 47g, and carbohydrate TR:TREATMENT_SUMMARY 110g per 1000 Kcal. The two omnivore diets were engineered to have a similar TR:TREATMENT_SUMMARY composition to EEN. All the subjects consumed the menu A on day 11 and menu B on TR:TREATMENT_SUMMARY days 4 and 14. Diets for omnivores were constructed to provide the expected TR:TREATMENT_SUMMARY total calories required per day for the participant to maintain their current TR:TREATMENT_SUMMARY weight and were adjusted if there was weight gain or loss of more than 2.5 TR:TREATMENT_SUMMARY pounds. On days 6, 7, and 8, inpatients participants received vancomycin 500mg TR:TREATMENT_SUMMARY orally every 6 hours and neomycin 1000mg orally every 6 hours. On day 7, TR:TREATMENT_SUMMARY participants consumed 4L of polyethylene glycol (PEG) based bowel purgative TR:TREATMENT_SUMMARY (GoLytely®). Participants in the omnivore and EEN arms left the inpatient TR:TREATMENT_SUMMARY research unit only under the direct supervision of a research staff member. The TR:TREATMENT_SUMMARY vegan outpatients reported to the hospital twice on days 6,7 and 8 to receive TR:TREATMENT_SUMMARY antibiotics and to consume PEG on day 7. #SAMPLEPREP SP:SAMPLEPREP_SUMMARY Plasma samples were thawed on ice and aliquoted for metabolite profiling SP:SAMPLEPREP_SUMMARY analyses. Plasma samples were thawed and aliquoted for each LC-MS method. LC-MS SP:SAMPLEPREP_SUMMARY samples were prepared for four profiling methods as follows: HILIC-pos: SP:SAMPLEPREP_SUMMARY Metabolites were extracted by adding 90 μL of 74.9:24.9:0.2 v/v/v SP:SAMPLEPREP_SUMMARY acetonitrile/methanol/formic acid containing stable isotope-labeled internal SP:SAMPLEPREP_SUMMARY standards (valine-d8, Isotec; and phenylalanine-d8, Cambridge Isotope SP:SAMPLEPREP_SUMMARY Laboratories; Andover, MA) to a 10 μL aliquot of stool homogenate or plasma. SP:SAMPLEPREP_SUMMARY Samples were vortexed and then centrifuged (10 min, 9,000 x g, 4°C) to pellet SP:SAMPLEPREP_SUMMARY protein precipitates. Supernatants were transferred to glass autosampler vials SP:SAMPLEPREP_SUMMARY containing inserts for LC-MS analysis. C8-pos: Lipids were extracted by adding SP:SAMPLEPREP_SUMMARY 190 μL of isopropanol containing SP:SAMPLEPREP_SUMMARY 1-dodecanoyl-2-tridecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine as an internal standard SP:SAMPLEPREP_SUMMARY (Avanti Polar Lipids; Alabaster, AL) to a 10 μL aliquot of stool homogenate or SP:SAMPLEPREP_SUMMARY plasma. Samples were vortexed and then centrifuged (10 min, 9,000 x g, ambient SP:SAMPLEPREP_SUMMARY temperature) to pellet protein precipitates. Supernatants were transferred to SP:SAMPLEPREP_SUMMARY glass autosampler vials containing inserts for LC-MS analysis. HILIC-neg: SP:SAMPLEPREP_SUMMARY Metabolites were extracted by adding 120 μL of 80% methanol containing SP:SAMPLEPREP_SUMMARY inosine-15N4, thymine-d4 and glycocholate-d4 internal standards (Cambridge SP:SAMPLEPREP_SUMMARY Isotope Laboratories; Andover, MA) to a 30 μL aliquot of stool homogenate or SP:SAMPLEPREP_SUMMARY plasma. Samples were vortexed and then centrifuged (10 min, 9,000 x g, 4°C) to SP:SAMPLEPREP_SUMMARY pellet protein precipitates. Supernatants were transferred to glass autosampler SP:SAMPLEPREP_SUMMARY vials containing inserts for LC-MS analysis. C18-neg: Metabolites were extracted SP:SAMPLEPREP_SUMMARY by adding 90 μL of methanol containing PGE2-d4 as an internal standard (Cayman SP:SAMPLEPREP_SUMMARY Chemical Co.; Ann Arbor, MI) to a 30 μL aliquot of stool homogenate or plasma. SP:SAMPLEPREP_SUMMARY Samples were vortexed and then centrifuged (10 min, 9,000 x g, 4°C) to pellet SP:SAMPLEPREP_SUMMARY protein precipitates. Supernatants were transferred to glass autosampler vials SP:SAMPLEPREP_SUMMARY containing inserts for LC-MS analysis. #CHROMATOGRAPHY CH:CHROMATOGRAPHY_SUMMARY C8-pos: high resolution and accurate mass profiling of polar and nonpolar lipids CH:CHROMATOGRAPHY_SUMMARY using reversed phase C8 chromatography and positive ion mode full scan MS CH:INSTRUMENT_NAME Shimadzu Nexera X2 CH:COLUMN_NAME Waters Acquity BEH C8 (100 x 2.1mm,1.7um) CH:COLUMN_TEMPERATURE 40 ℃ CH:FLOW_GRADIENT linear CH:FLOW_RATE 450 uL/min CH:SOLVENT_A 95% water/5% methanol; 0.1% formic acid; 10 mM ammonium acetate CH:SOLVENT_B 100% methanol; 0.1% formic acid CH:CHROMATOGRAPHY_TYPE Reversed phase #ANALYSIS AN:ANALYSIS_TYPE MS #MS MS:INSTRUMENT_NAME Thermo Exactive Plus Orbitrap MS:INSTRUMENT_TYPE Orbitrap MS:MS_TYPE ESI MS:MS_COMMENTS MS analyses were carried out using electrospray ionization in the positive ion MS:MS_COMMENTS mode using full scan analysis over m/z 200-1100 at 70,000 resolution and 3 Hz MS:MS_COMMENTS data acquisition rate. Additional MS settings were: ion spray voltage, 3.0 kV; MS:MS_COMMENTS capillary temperature, 300°C; probe heater temperature, 300°C; sheath gas, 50; MS:MS_COMMENTS auxiliary gas, 15; and S-lens RF level 60. All raw data were processed using MS:MS_COMMENTS Progenesis QI software (NonLinear Dynamics) for feature alignment, nontargeted MS:MS_COMMENTS signal detection, and signal integration. Targeted processing of a subset of MS:MS_COMMENTS known lipids was conducted using TraceFinder software (Thermo Fisher Scientific; MS:MS_COMMENTS Waltham, MA). Lipid identities were confirmed using reference standards MS:MS_COMMENTS representative of different lipid classes and previously characterized reference MS:MS_COMMENTS samples. Lipids were denoted by headgroup and total acyl carbon number and MS:MS_COMMENTS double bond content. MS:ION_MODE POSITIVE #MS_METABOLITE_DATA MS_METABOLITE_DATA:UNITS unitless peak areas MS_METABOLITE_DATA_START Samples 9016-2-PE 9024-2-PE 9034-2-PE 9038-2-PE 9016-2-PB 9024-2-PB 9034-2-PB 9038-2-PB 9016-2-PA 9024-2-PA 9034-2-PA 9038-2-PA 9016-2-PD 9024-2-PD 9034-2-PD 9038-2-PD 9016-2-PC 9024-2-PC 9034-2-PC 9038-2-PC 9003-2-PE 9009-2-PE 9013-2-PE 9025-2-PE 9029-2-PE 9032-2-PE 9003-2-PB 9009-2-PB 9013-2-PB 9025-2-PB 9029-2-PB 9032-2-PB 9003-2-PA 9009-2-PA 9013-2-PA 9025-2-PA 9029-2-PA 9032-2-PA 9003-2-PD 9009-2-PD 9013-2-PD 9025-2-PD 9029-2-PD 9032-2-PD 9003-2-PC 9009-2-PC 9013-2-PC 9025-2-PC 9029-2-PC 9032-2-PC QPP02 QPP04 QPP05 QPP06 QPP08 9014-3-PE 9026-3-PE 9027-3-PE 9031-3-PE 9014-3-PB 9026-3-PB 9027-3-PB 9031-3-PB 9014-3-PA 9026-3-PA 9027-3-PA 9031-3-PA 9014-3-PD 9026-3-PD 9027-3-PD 9031-3-PD 9014-3-PC 9026-3-PC 9027-3-PC 9031-3-PC 9002-3-PE 9004-3-PE 9008-3-PE 9017-3-PE 9022-3-PE 9035-3-PE 9002-3-PB 9004-3-PB 9008-3-PB 9017-3-PB 9022-3-PB 9035-3-PB 9002-3-PA 9004-3-PA 9008-3-PA 9017-3-PA 9022-3-PA 9035-3-PA 9002-3-PD 9004-3-PD 9008-3-PD 9017-3-PD 9022-3-PD 9035-3-PD 9002-3-PC 9004-3-PC 9008-3-PC 9017-3-PC 9022-3-PC 9035-3-PC 9010-1-PE 9015-1-PE 9010-1-PB 9015-1-PB 9010-1-PA 9015-1-PA 9010-1-PD 9015-1-PD 9010-1-PC 9015-1-PC 9005-1-PE 9006-1-PE 9019-1-PE 9030-1-PE 9033-1-PE 9036-1-PE 9037-1-PE 9040-1-PE 9005-1-PB 9006-1-PB 9019-1-PB 9030-1-PB 9033-1-PB 9036-1-PB 9037-1-PB 9040-1-PB 9005-1-PA 9006-1-PA 9019-1-PA 9030-1-PA 9033-1-PA 9036-1-PA 9037-1-PA 9040-1-PA 9005-1-PD 9006-1-PD 9019-1-PD 9030-1-PD 9033-1-PD 9036-1-PD 9040-1-PD 9005-1-PC 9006-1-PC 9019-1-PC 9030-1-PC 9033-1-PC 9036-1-PC 9037-1-PC 9037-1-PD 9040-1-PC Factors Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Baseline Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Baseline Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Baseline Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Baseline Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 12 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 12 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 12 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 12 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 15 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 15 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 15 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 15 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 5 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 5 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 5 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 5 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 9 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 9 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 9 Study_Diet:Modulen | Sex:Female | Time:Day 9 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Modulen | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:NA | Sex:NA| Time:NA Study_Diet:NA | Sex:NA| Time:NA Study_Diet:NA | Sex:NA| Time:NA Study_Diet:NA | Sex:NA| Time:NA Study_Diet:NA | Sex:NA| Time:NA Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Baseline Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Baseline Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Baseline Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Baseline Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 12 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 12 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 12 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 12 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 15 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 15 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 15 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 15 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 5 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 5 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 5 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 5 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 9 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 9 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 9 Study_Diet:Vegan | Sex:Female | Time:Day 9 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Vegan | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Western | Sex:Female | Time:Baseline Study_Diet:Western | Sex:Female | Time:Baseline Study_Diet:Western | Sex:Female | Time:Day 12 Study_Diet:Western | Sex:Female | Time:Day 12 Study_Diet:Western | Sex:Female | Time:Day 15 Study_Diet:Western | Sex:Female | Time:Day 15 Study_Diet:Western | Sex:Female | Time:Day 5 Study_Diet:Western | Sex:Female | Time:Day 5 Study_Diet:Western | Sex:Female | Time:Day 9 Study_Diet:Western | Sex:Female | Time:Day 9 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Baseline Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 12 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 15 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 5 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 9 Study_Diet:Western | Sex:Male | Time:Day 9 7-dehydro-desmosterol 2512.0000 1938.0000 4832.0000 3769.0000 2989.0000 1442.0000 4632.0000 3926.0000 3034.0000 3380.0000 4346.0000 2358.0000 2855.0000 3342.0000 3936.0000 3638.0000 2451.0000 4209.0000 3387.0000 3183.0000 2557.0000 2254.0000 2918.0000 2413.0000 2311.0000 2228.0000 1716.0000 2014.0000 4008.0000 3048.0000 2160.0000 1433.0000 2347.0000 1744.0000 3428.0000 2895.0000 2004.0000 2250.0000 2280.0000 1864.0000 3136.0000 2053.0000 2052.0000 1798.0000 2100.0000 1884.0000 3256.0000 2318.0000 2434.0000 2015.0000 3670.0000 2168.0000 3840.0000 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